制備液相色譜儀是近30年發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測(cè)定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動(dòng)該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。
根據(jù)用途和泵配置的不同,一般可以將常見的實(shí)驗(yàn)室級(jí)別LC分為以下幾種:分析型液相色譜儀(HPLC),半制備液相色譜儀(Semi-PrepHPLC)和制備型液相色譜儀(Prep-HPLC)以及中壓液相色譜儀(MPLC)。這三者的原理基本一樣,不同之處主要在于泵的大流速,一般而言,分析型HPLC的大流速為10.00mL/min,半制備HPLC為50mL/min,制備HPLC為100mL/min,中壓液相色譜更高。而由于泵流速的升高,流通池的光程、體積,管道的內(nèi)徑,六通閥、定量環(huán)等零件也會(huì)相應(yīng)改變;并且,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的需要,可以增加自動(dòng)接收器等配件。
泵形式:串聯(lián)雙柱塞浮動(dòng)式密封圈。
泵頭自沖洗功能。
“自吸式單向閥”技術(shù),可延長密封圈使用壽命。
程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動(dòng)補(bǔ)償。
完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換。
制備液相色譜儀主要用于以下領(lǐng)域:
1、天然藥物化學(xué)、中藥化學(xué):這是國內(nèi)目前廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個(gè)搞天然藥化的實(shí)驗(yàn)室都至少有一臺(tái)液相,土豪實(shí)驗(yàn)室人手一臺(tái)液相。
2、蛋白純化:相對(duì)于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn),但是發(fā)展很迅速。同時(shí),由于外國儀器廠家在這個(gè)領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì)不算太大,目前國內(nèi)也在這個(gè)領(lǐng)域加快發(fā)展,搶占地盤。
3、藥物雜質(zhì)純化:由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率,往往伴有副產(chǎn)品,如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量,這就得靠液相色譜。
4、手性化合物的制備:這個(gè)主要是有機(jī)合成和方法學(xué)的在用。