液相色譜儀的系統(tǒng)主要是由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
液相色譜儀在使用上遇到這三種常見故障應(yīng)該如何進(jìn)行及時(shí)處理?
操作液相色譜儀可能遇到壓力波動大,峰分叉的現(xiàn)象:
這種現(xiàn)象是由于系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使兩者不能密封,這時(shí)我們需要注意觀察流動相的量,保證不銹鋼氯氣沉入儲液器瓶底,避免吸入空氣,流動相要充分脫氣,如果是單向閥與閥座之間有異物就得拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。
當(dāng)
液相色譜儀出現(xiàn)既無壓力指示也沒有液體流過該怎么辦呢?
我們首先分析原因,出現(xiàn)這一現(xiàn)象無非兩種原因:大量氣泡進(jìn)入泵體或者泵密封墊圈磨損。如果是第1種情況,在泵作用的同時(shí),用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣;如果是第二種情況則需要更換密封墊圈。
峰面積重復(fù)性不佳:
進(jìn)樣閥漏液;加樣針不到位;液量不足。
處理對于第1種情況更換進(jìn)樣閥墊圈;對于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài),以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中,液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要,如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中,儲液器內(nèi)的溶液如長時(shí)間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,防止無機(jī)鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì),*溶解,盡量減少對色譜柱的污染,以延長色譜柱的使用壽命,同時(shí)避免注射過濃的樣品溶液,以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞;色譜柱作好標(biāo)記,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。