高效液相色譜是應用zuì多的色譜分析方法,
高效液相色譜系統一般由溶劑輸送系統、進樣系統、分離系統(色譜柱)、檢測系統和數據處理與記錄系統組成,具體包括儲液器、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數據工作站等幾部分。其中輸液泵、色譜柱和檢測器是HPLC儀的關鍵部分。
1、溶劑輸送系統:
儲液器:用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器,以防止流動相中的顆粒進入泵內。
脫氣器:脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器,從而引起噪聲,不能正常檢測。
輸液泵:將儲液器中的流動相連續(xù)不斷地以高壓形式進入液路系統,使樣品在色譜柱中完成分離過程。
梯度洗脫裝置:是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進樣系統:
進樣器:是高效液相色譜系統中將樣品送入色譜柱的裝置,進樣方式可以分為兩種:閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣。
3、分離系統:
色譜柱:對樣品進行分離,是整個色譜系統的心臟,它的質量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統:
檢測器:是高效液相色譜系統的眼睛,在色譜分析中占據著重要的地位,主要作用是將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉變成易于測量的電信號,被數據系統接收,得到樣品分離的色譜圖。
高效液相色譜系統常用的檢測器一般有五種,包括紫外檢測器(用途zuì廣的檢測器),示差檢測器(糖類,糖類化合物等),蒸發(fā)光散射檢測器(黃芪等中藥材),熒光檢測器(黃曲霉等),二極管陣列檢測器,具體選擇哪款檢測器,可以根據自己的實際需要選擇。
5、數據處理和記錄系統:
色譜數據處理系統在數據采集時能對進樣器、泵及閥進行實時控制,可實現自動進樣,數據采集、泵及閥控制、數據處理、定性定量分析、數據存儲、報告輸出等分析過程的*自動化。